角分辨散射儀的操作經(jīng)驗分享

　　角分辨散射儀是以特定頻率入射光照射這些粒子，它們不吸收入射光能量，而僅作為二次波源向各個方向發(fā)射與入射光頻率相同的球面散射光，這種沒有頻率位移（即無能量變化）的散射稱為彈性光散射（elastic light scattering），也常稱為經(jīng)典光散射（classical light scattering）、靜態(tài)光散射（static light scattering）在靜態(tài)光散射情況下，通常用來表征一個體系的散射能力和角度依賴性。

　　角分辨散射儀譜操作規(guī)程：

　　1、開機前準備：水：蒸餾水，有機溶劑：色譜純。緩沖鹽溶液：配置完成后過2層0.22um濾膜。流動相需準備充足。

　　2、系統(tǒng)平衡：根據(jù)需要選擇凝膠柱以及需要連接的檢測器。開啟脫氣機，泵、柱溫箱、檢測器以及電腦開關。點擊quick start pump進行流速設置，點擊ASTRA進行實驗方法設置。提前24小時將流速調(diào)至試驗所需流速進行系統(tǒng)平衡，其中注意流動相過渡問題，待檢測器沖平后可進行進樣分析。

　　3、進樣：建議標準樣品歸一化處理，用于激光18角度校正，建議進樣前進行該處理。多糖需用3-5mg/mL分子量為五萬以下的右旋糖酐進行激光，蛋白質(zhì)以2-4mg/mL的BSA作為歸一化樣品。所以樣品離心后取上層清液過0.45um濾膜。手動進樣器扳至load狀態(tài)進行進樣，一般需進3-5倍進樣環(huán)體積以清洗進樣環(huán)，點擊軟件中運行后將進樣器扳至Inject狀態(tài)進行數(shù)據(jù)采集。

　　4、數(shù)據(jù)分析：數(shù)據(jù)采集后需進行定基線、峰等數(shù)據(jù)處理，依據(jù)實驗需要提前實驗數(shù)據(jù)。所有數(shù)據(jù)可以通過圖表中郵件中edit進行數(shù)據(jù)導出。

　　5、關機：色譜柱和系統(tǒng)清洗-流動相沖洗2-3個小時，根據(jù)流動相性質(zhì)選擇合適溶劑過渡，如緩沖鹽流動相沖洗后需用萬分之二疊代鈉清洗一晚上后換20%甲醇沖洗足夠時間后，進行色譜柱保存，關閉儀器電源。實驗完成后做好登記工作。